寵物生化檢測指標(1):谷丙轉氨酶(ALT)

2019-11-28     貓MAO醫聖
谷丙轉氨酶(ALT)主要存在於各種細胞中,尤以肝細胞為最,整個肝臟內轉氨酶含量約為血中含量的100倍。正常時,只要少量釋放入血中,血清中其酶的活性即可明顯升高。在各種病毒性肝炎的急性期、藥物中毒性肝細胞壞死時,ALT大量釋放入血中,因此它是診斷病毒性肝炎、中毒性肝炎的重要指標。肝細胞內谷丙轉氨酶的濃度比血清高1000~3000倍。只要有1%的肝細胞壞死,便可使血中酶活性增高1倍,因此轉氨酶(尤其是ALT)是急性肝細胞損害的敏感標誌。

在肝細胞中,GPT把丙氨酸的氨基轉移給a-酮戊二酸,把酮戊二酸的羰基轉移給丙氨酸,這樣丙氨酸成為丙酮酸,a--酮戊二酸成為谷氨酸。

生理學

丙氨酸氨基轉移酶(ALT)催化丙氨酸的氨基轉移到-酮戊二酸,導致丙酮酸和谷氨酸的形成。

ALT主要位於細胞質中(線粒體中含量較少),與AST相似,需要輔因子P5P才能獲得最大的酶活性。

這是一個有用的具體指標肝細胞損傷的狗和貓。ALT在大型動物和豬的肝臟疾病中不是一個有用的指標,因為這些物種的肝臟組織中酶活性低。SDH和GLDH是所有物種中ALT的可行標誌。

犬血清半衰期為59小時,貓血清半衰期< 24小時(約3-4小時)。急性肝損傷後,血清酶活性在48小時左右達到峰值,然後開始下降。酶的增加是由於細胞損傷(細胞膜通透性增加或壞死)和誘導(合成增加)。

器官特異性

ALT存在於肝臟、肌肉(心臟和骨骼)、腎臟和紅血球(某些種類)。ALT在狗、貓、兔子、老鼠和靈長類動物的肝臟中具有相當的特異性。在狗和貓的嚴重肌肉疾病中,由於該組織中酶的釋放,一些增加是可能的(在這種情況下,AST的更高的增加是典型的)。

檢測方法

ALT催化 α-ketoglutarate和丙氨酸形成L-glutamate和丙酮酸。ALT催化這一反應達到平衡,丙酮酸水平的增加可以通過隨後在乳酸脫氫酶(LDH)存在下NADH的還原來量化。通過光度法測定了NADH水平的降低,並與丙酮酸的生成速率成正比,而丙酮酸的生成速率與ALT活性有關。

反應如下:

丙氨酸+α-ketoglutarate ALT >丙酮酸+ L-glutamate

丙酮酸+ NADH + H+ LDH > l -乳酸鹽+ NAD+

度量單位

酶活性以U / L (U =國際單位)和µkat / L(國際標準單位),它被定義為催化的酶量的轉換在指定條件下每分鐘1µmol襯底。換算公式如下:

0.0167 U / L x =µkat / L

樣品注意事項:血清和血漿

抗凝劑:肝素鈉、乙二胺四乙酸

穩定

人血清和血漿樣品中ALT活性的穩定性如下(根據產品信息表):15-25℃3天,2 -8℃7天,(-60)-(-80)℃7天以上。

一些因素的影響:

血脂/濁度、黃疸:無明顯干擾。

溶血:在某些物種中,如貓和豬,血管內或體外溶血可能由於紅細胞釋放ALT而增加活性。在豬中,>100單位的溶血使ALT中值增加了8 U/L (di Martino等,2015年)。

藥物:抗驚厥藥(普米酮、苯巴比妥、苯妥英)可使ALT活性增加4倍。雖然這些藥物被認為可以誘導ALT合成,但ALT活性的增加主要被認為是肝細胞壞死引起的。糖皮質激素使谷丙轉氨酶升高約2-3倍。類固醇性肝病(發生肝細胞損傷的地方)的活動更高。這是目前歸因於滲透率的改變,而不是由於增加了合成。任何可能引起肝毒性的藥物都可能導致ALT活性升高,如貓體內的四環素、狗體內的caparsolate、對乙醯氨基酚。某些藥物可能通過削弱維生素B6對P5P的激活來降低ALT(和AST)活性,如頭孢菌素、環孢素、異煙肼。

ALT活動增加

人為因素:血管內或體外溶血可能導致貓或豬體內溶血水平升高。貓有一個高的紅細胞對血漿ALT比率。相比之下,溶血(血管內或體外)對牛、馬和狗的ALT影響很小。

病理生理的:

肝臟疾病:在原發性和繼發性肝臟疾病中都可以看到ALT活性的增加,如果發生細胞膜通透性改變或壞死,並且不是肝臟疾病的特異性病因。在壞死性或炎症性疾病中,ALT升高最高,而一些疾病,如肝細胞癌或肝功能不全,如果沒有發生活性肝細胞損傷,可能與ALT升高無關。在肝臟疾病中,ALT活性通常超過AST活性。由於殘留的膽鹽對肝細胞的毒性作用,膽管阻塞或其他導致膽汁淤積的原因可能會增加ALT(和AST)活性。

膽汁淤積症時,膽汁淤積酶(ALP、GGT)和膽紅素的升高幅度通常高於肝漏酶的升高幅度,這有助於明確膽汁淤積的主要病理過程,進而導致肝損傷。當肝損傷引起膽汁淤積時,漏酶增加倍數大於誘導酶,總膽紅素可能正常或輕度升高。外傷常常會增加ALT活性,即使沒有細胞損傷的形態學證據。

肌肉疾病:在大型動物中,ALT活性會隨著肌肉損傷而增加,在這方面它並不比AST更有用,因此它沒有被包括在大型動物化學小組中。嚴重肌肉損傷的小動物(貓缺血性肌病,犬肌營養不良,CK活性通常為> 10000 U/L), ALT隨CK和AST活性增加。然而,在原發性肌肉疾病中,ALT活性的增加通常小於AST活性的增加,SDH值應該是正常的(除非並發肝損傷)(Valentine et al 1990)。

甲狀腺功能亢進症:患有甲狀腺功能亢進症的貓,其ALT、AST和ALP活動通常會輕微增加。

文章來源: https://twgreatdaily.com/xx4FuG4BMH2_cNUgR0j3.html