試驗方法
1、快速藥敏試驗
採取病料後直接塗布進行藥敏試驗，與病原菌分離同時進行，可根據藥敏結果初步進行治療。此種方法適用於發病初期病料組織，8-16小時可快速出具檢測結果。
2、前增菌培養法藥敏試驗
前增菌培養法耗時略長，需要2-3天的時間，先對細菌增菌培養後再進行藥敏試驗。此種方法可避免快速藥敏試驗由於無細菌生長或細菌生長較少、抑菌圈不明顯等而導致不能及時讀取結果的情況出現。
3、傳統法藥敏試驗
傳統法耗時較長，需要3-4天的時間，對於一般養殖場定期監測病原菌及其敏感性時可以使用此方法。能較好地分離出病原菌，病原菌經純培養後，進行藥敏試驗，得出的數據可以準確反應出病原菌對某一藥物的敏感性。
操作方法
1、快速藥敏實驗
（1）樣品處理
用燒灼的滅菌刀片燙灼組織表面雜菌，無菌操作用剪刀剪取組織，置於滅菌平皿中，滴加適量生理鹽水，剪碎並混勻組織，呈糊狀最佳。
（2） 塗板
用滅菌棉簽沾取病料組織混懸液，均勻塗抹於營養瓊脂平板上，反覆2次，每次將平板旋轉60度，最後沿周邊繞兩圈，確保塗抹均勻。
（3） 貼藥敏紙片及培養
用鑷子夾取藥敏紙片平放在瓊脂平板上，並輕壓使緊貼於瓊脂平板表面，藥敏紙片一旦接觸培養基表面不要再移動。在培養基中央貼一片，外周以等距離貼若干種紙片，一個平板（直徑90毫米）可貼6-7個抗菌藥敏片，並標記每個藥敏片的藥名。貼好紙片的平板於37℃培養16-24小時觀察結果。
2、前增菌培養法藥敏實驗
（1） 樣品處理：
用滅菌棉簽沾取組織內部，然後打開裝有增菌液（營養肉湯）的試管，使棉簽與增菌液混合，反覆擠壓5次，取出棉簽過火焰燒灼滅菌棄掉。試管口和試管塞過火焰滅菌，蓋上試管塞，做好標記，放入恆溫箱中37℃培養12-24小時，此肉湯菌液為前增菌液。
（2） 塗板
用滅菌棉簽沾取前增菌液或稀釋後增菌液，在管壁輕碰幾下，擠掉多餘水分，均勻塗抹於營養瓊脂平板上，反覆2次，每次將平板旋轉60度，最後沿周邊繞兩圈，保證塗均勻。
（3） 貼藥敏紙片及培養
用鑷子夾取藥敏紙片平放在瓊脂平板上，並輕壓使緊貼於瓊脂平板表面，藥敏紙片一旦接觸培養基表面不要再移動。在培養基中央貼一片，外周以等距離貼若干種紙片，一個平板（直徑90毫米）可貼6-7個抗菌藥敏片，並標記每個藥敏片的藥名。貼好紙片的平板於37℃培養16-24小時觀察結果。
3、傳統藥敏實驗
（1） 樣品處理
用燒灼的滅菌剪刀燙灼組織表面雜菌，用剪刀在病料組織中剪開一切口，用棉簽或接種環沾取組織病料，進行細菌分離，培養16-18小時後挑取接種平皿中菌落，置於無菌1.5ml離心管中，滴加500ul生理鹽水，混勻菌落。注意同時對分離細菌和進行藥敏實驗菌落進行染色，確定為同種致病菌。
（2） 塗板
用滅菌棉簽沾取菌落混懸液，均勻塗抹於營養瓊脂平板上，反覆2次，每次將平板旋轉60度，最後沿周邊繞兩圈，保證塗均勻。
（3） 貼藥敏紙片及培養
用鑷子夾取藥敏紙片平放在瓊脂平板上，並輕壓使緊貼於瓊脂平板表面，藥敏紙片一旦接觸培養基表面不要再移動。在培養基中央貼一片，外周以等距離貼若干種紙片，一個平板（直徑90毫米）可貼6-7個抗菌藥敏片，並標記每個藥敏片的藥名。貼好紙片的平板於37℃培養16-24小時觀察結果。
觀察結果及判定標準
1、說明
經培養後，凡對塗布的細菌有抑制能力的抗菌藥物，在其紙片四周出現一個無菌生長的圓圈，稱為抑菌圈。可用直尺測量其抑菌圈的大小，抑菌圈越大，說明該菌對此種藥物敏感性越大，反之越小。若無抑菌圈，則說明該菌對此藥具有耐藥性。
2、判定標準
根據《抗微生物藥物敏感性試驗執行標準2010》中的判斷標準進行判斷，對於商品藥物，抑菌圈直徑＞20mm為極敏，15-20mm為高敏，10-14mm為中敏，＜10mm為低敏，0為耐藥。
3、注意事項
（1）製備紙片的濾紙要求吸水性好，均勻不含無關的化學物質或色素。
（2）乾燥的藥敏紙片必須在密封，放有乾燥劑的容器中存放，以防受潮。
（3）藥敏紙片製備後立即用敏感細菌作藥敏試驗，並記錄其抑菌圈，每月複查一次。
（4）培養基要求是適合常見致病菌生長，不含被試藥物的拮抗劑。
（5）培養基厚度對抑菌圈大小有直接影響，要求3-4mm厚的平板。
（6）培養基PH值對某些藥物抑菌區影響很大，一般PH應為7.2-7.4。
文章來源：獸藥資訊
文章來源: https://twgreatdaily.com/PUHBjHEBfwtFQPkdmGF6.html