HIV診斷標誌物匯總,詳解各種HIV方法檢測的標誌物和臨床意義

2019-07-10     知艾君

檢測HIV對於篩查,確認和監測感染至關重要。有不同類型的診斷工具可用於檢測HIV特異性抗體,病毒抗原或核酸。檢測HIV特異性IgG和IgM抗體的第三代酶免疫檢測,檢測抗HIV抗體和HIV p24抗原的第四代酶免疫檢測以及基於核酸的HIV RNA檢測是目前最常用的診斷方法;對於HIV感染患者,HIV 病毒載量檢測和CD4+細胞計數等是最常用的監控方法;HIV基因分型檢測用於檢測 HIV 基因組突變,其對研究和改善HIV病毒的藥物抗性非常有用;干血斑測試對於幼兒和偏遠地區HIV感染疫情的掌握有著獨特的優勢;一些常用的免疫因子,感染指標,血栓標誌物對於HIV感染後期患者監控具有一定指導意義。生物標誌物的發展的利用對於病情的篩查、診斷、監控和治療具有指明燈似的作用,對於控制HIV感染和AIDS的治療起到了關鍵性作用。

目前常用的HIV感染指標


1 血清學檢測

HIV-1/2抗體

應用:HIV感染篩選和HIV感染確認。

篩選測試方法:酶聯免疫吸附測試、化學發光、免疫螢光、免疫層析試紙條、免疫滲濾法等測試方法。

確認測試方法:免疫印跡、條帶/線性免疫實驗(RIBA/LIA)、間接免疫螢光(IFA)和快速確認等方法。

HIV-1/2抗體是應用最多,且效果最好的感染篩選指標。相比於HIV抗原p24,儘管其窗口期更長,但不存在後期衰減。相比於HIV RNA,其成本更低,方法更多,更適合普及HIV感染篩選。

HIV抗原p24

應用:HIV感染篩選

測試方法:酶聯免疫吸附測試、化學發光、免疫螢光、免疫層析試紙條、免疫滲濾法等測試方法。

HIV抗原p24無法單獨應用於HIV感染篩選,但可結合HIV-1/2抗體進行早期感染篩選。其窗口期更短,是目前四代HIV試紙條的基礎。


2 病毒學檢測

HIV病毒分離

應用:HIV感染確認。

測試方法:外周血單核細胞(PBMC)共培養法。

陽性判定:培養上清液p24抗原或逆轉錄酶連續2次呈現陽性反應、並有p24抗原含量/逆轉錄酶活性升高,或同時出現HIV特異性細胞病變,並經鑑定為HIV基因序列,判為HIV-1分離陽性。

HIV病毒分離陽性是最直接的HIV感染確認方法。但該法檢測技術要求較高,較難普及。同時分離陰性並不能排除HIV感染。

HIV核酸檢測

應用:HIV感染篩查、HIV感染確認、嬰兒HIV感染篩查、抗逆轉錄病毒治療監控等。

HIV定性檢測:實時定量PCR。

HIV定量檢測:靶核酸擴增和信號放大。

定量結果判定:新行標規定,當檢測值>5000 cps/mL報告陽性檢測值;檢測值<5000cps/mL,需要再次採樣檢測,以確認檢測值。最終結果需要結合臨床及流行病史、CD4+淋巴細胞檢測或者HIV-1抗體檢測結果進行綜合判斷。

HIV核酸檢測的窗口期更短,且是抗逆轉錄病毒治療效果監控推薦的指標之一。儘管行標把核酸診斷納入全民篩查方法,但較HIV-1/2抗體和HIV抗原p24,核酸檢測技術難度和成本都也更高。HIV核酸檢測是嬰兒HIV感染最好的篩查指標。


3 細胞免疫學檢測

CD4+淋巴細胞檢測

應用:HIV感染檢測、AIDS分期、抗逆轉錄病毒治療監控等。

CD4+淋巴細胞計數:用於成人及5歲以上兒童和青少年。當計數結果≥500/mm³,則無缺陷。350-499/mm³,輕度缺陷。200-349/mm³,中度缺陷。<200/mm³,重度免疫缺陷。

CD4+淋巴細胞百分比:用於5歲以下兒童。具體判定標準如下。


判定標準

檢測技術:流式細胞儀或顯微鏡手動計數。

CD4+淋巴細胞檢測是HIV感染和AIDS分期的判定標準。無法單獨作為篩查的診斷標誌物。

匯總表格如下


匯總表格


其它標誌物:應用於HIV感染監控

1 基因分型檢測

研究該技術的企業有雅培和西門子。基因分型系統適用於檢測 HIV 基因組突變(這些突變賦予其對特定類型抗逆轉錄病毒藥物的抗性),從而作為監測和治療 HIV 感染的輔助手段。本質上這是一個技術集成系統,包括樣品準備系統,反轉錄PCR系統,測序系統,毛細管電泳系統和報告系統。

2 干血斑測試

干血斑(Dry Blood Spots, DBS)目前用在新生兒HIV早期感染診斷與偏遠落後地區HIV流行的監控。由於采血量少(50-80μL),採集製備成本低,製作簡單,適合運輸等特點,該方法在一些特殊場合有他的應用價值

3 免疫類標誌物

這些免疫因子儘管不屬於HIV感染的特異性標誌物,但可溶性白細胞介素-2受體,白細胞介素-6,血清IgA和血清細胞因子等的升高意味著HIV感染者的患病率會升高。

4 其它標誌物

HIV感染後期與慢性炎症相關的許多生物標誌物也會升高,這些疾病包括心血管疾病,多種形式的癌症,肝病,腎病,神經認知衰退和骨質疏鬆症等。白細胞介素-6,C-反應蛋白,D-二聚體這些都會在這個過程中出現異常。白細胞介素-6是一種細胞因子,目前也用作感染的生物標誌物。C-反應蛋白是目前最常用的感染生物標誌物之一。D-二聚體的升高證明了凝血酶正在生成,是血栓診斷常用的生物標誌物。目前大量的研究證明,HIV感染會增加靜脈血栓形成的風險。


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文章來源: https://twgreatdaily.com/zh/kvqjKmwBmyVoG_1Z8Mbb.html