免疫檢查點抑制劑（CPI）是近幾年來癌症治療領域的突破性進展，改變了許多癌症患者的預後[1, 2]，但 仍有相當一部分患者對抗PD-1/PD-L1治療抵抗[3]。
俗話說的好，「打虎親兄弟，上陣父子兵」，若能夠為CPI找一個強有力的幫手，或許能夠解決這部分耐藥的腫瘤。
研究發現， 對於晚期難治性實體腫瘤患者（很多對CPI耐藥），GEN1046安全性較好，且有效率達到65.6%（40/61）。這一結果提示GEN1046可用於治療對CPI耐藥的患者， 填補CPI耐藥患者治療的臨床空白。
論文首頁
4-1BB（CD137）是一種表達於活化的CD4+、CD8+T細胞和NK細胞表面的受體， 激活後可活化CD8+T細胞，增加T細胞總數並增強其功能[5]。
雖然4-1BB強激動性單抗（Urelumab）具有一定的臨床應用潛力，但由於具有顯著的肝毒性，因此其臨床應用受限[6]。而另一個4-1BB弱激動性單抗（Utomilumab），儘管肝毒性較小，但作為單藥治療的抗腫瘤活性很弱[7]。
GEN1046是一個基於DuoBody技術平台，通過單克隆 全人源PD-L1和人源化4-1BB抗體的Fab臂交換產生的PD-L1×4-1BB雙特異性抗體。
GEN1046構建示意圖
研究人員首先在體外研究了GEN1046與靶點的結合能力，發現在 0.01-1μg/mL範圍內同時結合PDL1和4-1BB的能力最強。
GEN1046雙特異性抗體還有一特殊之處，即 GEN1046的4-1BB激動特性只有在結合至PD-L1+細胞後才會產生，但在無4-1BB結合時也能阻斷PD-1/PD-L1通路。這意味著GEN1046的PD-L1特異性Fab臂能作為經典CPI發揮作用，同時減少了4-1BB受體非選擇性激活所帶來的副作用。
GEN1046的4-1BB激動特性只有在結合至PD-L1+細胞後才會產生
相比於PD-L1單抗、4-1BB單抗（或兩單抗結合）、PD-L1xctrl抗體以及ctrlx4-1BB抗體（或兩抗體結合）， GEN1046在體外可顯著促進CD8+T細胞的增殖，並增加促炎細胞因子的分泌（如IFNγ）。
緊接著，研究人員構建了人PD-L1（hPD-L1）和4-1BB雙敲入轉基因C57BL/6小鼠（hPD-L1/h4-1BB dKI小鼠），並將hPD-L1轉染的MC38腫瘤細胞（MC38-hPD-L1）植入小鼠，建立體內腫瘤模型。然後對小鼠給予GEN1046 5mg/kg（每周2次）治療，共給藥3周，以在體內評估GEN1046的抗腫瘤活性。
經治療後，研究人員驚喜地發現， 所有荷瘤小鼠均對治療有反應，且相較於對照組，干預組小鼠無進展生存期（PFS）顯著延長。在6隻療效達到完全緩解的小鼠中，再次接種MC38-hPD-L1腫瘤細胞不能使這些小鼠產生腫瘤，這表明 經GEN1046治療的小鼠可產生免疫記憶。
GEN1046小鼠體內實驗結果
為了進一步表征小鼠體內的抗腫瘤免疫反應，研究人員對接種MC38-hPD-L1腫瘤細胞的hPD-L1/h4-1BB dKI小鼠的腫瘤和脾臟進行了免疫表型鑑定，並檢測了血液內T細胞和相關細胞因子的含量。
研究結果發現，相比於PD-L1單抗治療和對照組的小鼠， GEN1046可誘導小鼠腫瘤內和脾臟內CD3+T細胞浸潤增加，其中大部分是CD8+T細胞，且外周血中IFNγ、TNFα、IL-2和CXCL10濃度增加，這些結果都表明GEN1046在體內具有很強的激活CD8+T細胞的能力。
研究人員還在食蟹猴中進行了毒理學實驗，在GEN1046的劑量達到30mg/kg（Q3W，治療兩周期）後，食蟹猴耐受性良好，未觀察到天冬氨酸轉氨酶（AST）或丙氨酸轉氨酶（ALT）升高。
臨床前的藥效學及安全性研究均表明GEN1046的治療潛力，因此，研究人員在晚期實體瘤患者中開展了臨床試驗。
藥代動力學分析顯示， GEN1046在輸液結束後很快即可達到峰濃度，在劑量低於200mg Q3W時在體內無明顯蓄積。首次給藥後，不同劑量水平的半衰期為2.3-10.3天。
與臨床前研究結果相一致， GEN1046可顯著增加患者外周血中CD8+T細胞和NK細胞數，並使得IFNγ、CXCL10等細胞因子濃度增加。
GEN1046可顯著增加患者外周血中CD8+T細胞數及相關細胞因子濃度
藥物的安全性分析顯示，GEN1046的總體耐受性良好。共有6例（9.8%）患者出現劑量限制毒性 （DLT：25mg，N=1；80mg，N=1; 140mg，N=2；200mg，N=1；800mg，N=1），包括中性粒細胞減少伴發熱（4級，N=2），免疫性腎炎（3級，N=1）和轉氨酶升高（3級，N=3）。 所有DLT經治療後均恢復且無後遺症。
43例（70.5%）患者發生了治療相關不良事件（AE），最常見的AE為轉氨酶升高、甲狀腺功能減退和疲勞。
大多數AE為1-2級，17例（27.9%）患者出現至少一次3-4級AE。6例（9.8%）患者出現3級轉氨酶升高，所有患者均未出現4-5級轉氨酶升高和與治療相關的膽紅素升高。除1例患者發生4級甲狀腺功能減退外，其他均為1-2級。
截至2021年2月12日，4例（6.6%）患者仍在接受GEN1046治療，患者中位隨訪時間為9.4個月， 疾病控制率為65.6%（40/61）。4例患者達到部分緩解，包括1例三陰性乳腺癌患者（100mg劑量下）、1例卵巢癌患者（80mg劑量下）和2例NSCLC患者（80和200mg劑量下）；36例患者病情穩定。
61例患者經GEN1046治療後效果
在患者體內，同樣可以觀察到 GEN1046給藥後外周血中CD8+效應T細胞數增加，以及IFNγ、CXCL9-11等細胞因子濃度增加。
GEN1046雙特異性抗體為提高CPI的臨床療效提供了一種全新的解決途徑，在阻斷PD-1/PD-L1通路的同時有條件的激活4-1BB，增強T細胞的功能，達到加強療效的效果。
本研究報道的GEN1046臨床前和I/IIa期臨床試驗結果清楚地表明，GEN1046在體內外均具有顯著的激活CD8+效應T細胞進而殺死腫瘤細胞的能力，同時在患者中具有良好的安全性與耐受性。 尤其是對於CPI治療耐受的患者，GEN1046對這些患者仍具有治療作用。
在本研究的基礎上，研究人員將擴大規模，進一步探索GEN1046治療的安全性和有效性，並探索GEN1046與其他治療方式聯用的策略，開啟免疫治療的另一個時代的序幕。
參考文獻
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